采購紫外分光光度計時應(yīng)該注意哪幾點?
自從60年前紫外分光光度計出現(xiàn)在實驗室的工作臺之后,已經(jīng)形成了種能解決廣泛難題的儀器,從單波長的測量到高性能多光譜的測量分析。科學家們選擇時需要根據(jù)自己實驗室的需要和目的用途來考慮,光學構(gòu)造和光源、探測方法、樣品類型和數(shù)據(jù)處理等都是要考慮的因素。
光學構(gòu)造
般來說,紫外光分光光度計分為單光束和雙光束兩類。顧名思義,單光束型主要是依賴單束光進行測量。束給定波長的光通過對照物,然后再通過實際樣品溶液,就能得到吸光結(jié)果。
雙光束型則是通過個斬光輪將束光分成兩束,分別測量對照樣品和實際樣品。可以小化光漂移和減少測量時間。些雙光型光度計不利用斬光輪,而是利用種光束分光器來代替,將束光分成兩束平行的光然后同時測量對照樣品和目的樣品。因為增加了測量的速度,所以雙光束分光光度計在測量些溶液隨時間動態(tài)變化的研究中大有用處。
光源和檢測方法
分光光度計的光譜也是需要考慮的個重要因素。實驗室研究人員希望省錢購入專門儀器定量核酸、蛋白或者細菌的生長情況。果果需要更大的靈活性,研究者可以考慮種更高性能的寬光譜儀器,可以程序性地進行ELISAs分析和比色分析。
紫外分光光度計般覆蓋190nm和380nm波長,通常利用氘燈照明。些特殊的儀器可以提供滿足光子學和半導(dǎo)體研究需要的光譜范圍。
些儀器具有多種光源供選擇:紫外光、可見光和甚至紅外光(780 nm 至3,000 nm)。鎢燈和鹵素燈般只覆蓋可見光部分(大約380 nm 到800 nm)。而氙燈則可以覆蓋紫外光和可見光區(qū)域。
分光光度計的帶寬很大程度上依賴于單色儀的狹縫的寬度。可以投射出實驗準確要求的光譜。種嚴格帶寬使得儀器能對復(fù)雜的混合物進行高分辨率的吸光測量。可變的單色儀的狹縫寬度能使臺分光光度計滿足多種實驗需要。
為了測量吸光值,分光光度計制造商通常使用光電倍增管和光敏二管。PMTs提供快速的反應(yīng)時間和良好的靈敏度,并且可以在紫外光譜調(diào)節(jié)至特定的范圍。但些制造商依賴于光敏二管的動態(tài)范圍在數(shù)秒內(nèi)行使所有的光譜測量。
樣品類型
在大部分的樣品類型中,分光光度計可接受樣品孔、小玻璃管cuvette、吸漿管和微孔板。微孔板主要是滿足高通量的需要和大規(guī)模的實驗室需求。但盡管對于小實驗室來說,制造商仍然提供了多種容器轉(zhuǎn)換器來滿足通量的要求和減少實驗時間。
用小試管cuvette裝樣品容量般從1 μl-5ml,并且些儀器裝備了各種樣品固定物來滿足各種改變需要。體現(xiàn)了柔韌性。