可見分光光度計是利用物質(zhì)對選擇性吸收光進行定性或定量分析的各種行業(yè)的材料已被廣泛應用,主要用于物質(zhì)純度檢測,定量分析,材料結構鑒定。可測量的結果總是可以接受或不可接受的誤差,誤差來自于測量過程的各個方面,我認為儀器本身的主要來源,以及測量條件的選擇,兩個方面。
1、儀器本身性能帶來的誤差
1.1、復色光對比耳定律的偏離
比耳定律是建立前提的先決條件是人們拍攝的光是單色的,但是儀器的精度又高,甚至雙單色儀可見分光光度計,只能得到近單色光,不能獲得純單色光,它仍然 包含窄帶的光,具有復雜光的性質(zhì)。雖然復雜的光將導致正或負偏差的比爾定律。固定狹縫紫外分光光度計的光譜帶寬般為1nm或2nm,可調(diào)節(jié)狹縫可以做到0. Inm;可見分光光度計帶寬為6nm,snm,甚至十幾納米。光譜帶寬應盡可能小,但隨著光譜分辨率的增加,儀器的靈敏度降低,因此選擇儀器來考慮各種條件的影響。 當溶液的濃度小且單色光相對純時,可以近似于Beer定律。
1.2、雜散光的影響
雜散光是指在要測量的波長的光譜帶寬之外進入檢測器的其他波長分量,這是光譜測量中的主要誤差源。 原因是:上海菁華可見分光光度計色散組件,反射鏡,透鏡和單色器壁灰塵。 在可見分光光度計的波段的邊緣,由于單色器光透射率,光源輻射強度,檢測器靈敏度低,雜散光的影響更為顯著。雜散光限制儀器的分析限可導致嚴重的測量誤差,實際工作中,在定量分析時,般在吸收峰或接近測量樣品的吸光度,如果分析含有雜散光的波長,則樣品光透射速率,并且通過在真實吸光度以下的大部分測量的吸光度來散射光。
1.3、儀器噪聲對測t的影響
儀器噪聲也是儀器的個重要指標,它表征儀器做稀溶液的能力。是疊加在待測量的分析信號中的不需要的信號,掃描100%T和0%T線,可觀察到分光光度計的絕對噪聲水平,如果儀器噪聲較大,會掩蓋較小的測量信號,般用噪音的二倍來表示儀器的靈敏度。
1.4、波長和吸光度準確度
樣品的每個值都是在定的波長下測得的,如果波長誤差很大,測出的值肯定不準。吸光度準確度也是用戶對儀器的直接要求,更應引起足夠的重視。家計量檢定規(guī)程規(guī)定雙光束紫外可見分光光度計透射比準確度為A士0.6%, B土1.0%。
2、測量條件的選擇
2.1、參比溶液和溶荊的選擇
上海儀電分析可見分光光度計實際上以穿過參考單元的光的強度作為人放射性的強度來測量樣品的吸光度。調(diào)節(jié)儀器使得通過參比池的溶液的吸光度為零,然后相同的光束通過樣品,使得吸光度相對真實反映待測物質(zhì)的濃度,因此選擇的參考解決方案非常重要。如果只有待測量的物質(zhì)被顯色劑的反應產(chǎn)物吸收,則純?nèi)軇┗蛘麴s水可用作參比溶液。如果顯色劑的顏色,在測量波長處的吸收,使用試劑溶液作為參比溶液,加入試劑量等試劑,并且樣品應與加入量致。如果樣品本身中其它組分的顏色干擾測定,并且所用的顯色劑沒有著色,則沒有顯影劑的樣品
溶液作參比液。
正確選擇合適的溶劑,對提高分析的準確度起重要作用。為減小溶劑中雜質(zhì)的影響,應選擇高純度的溶劑;溶劑應不與待測物質(zhì)發(fā)生化學反應;待測物在溶劑中要有定的溶解度;在測定的波長范圍內(nèi),溶劑本身沒有吸收,注意常用溶劑的短可用波長;當用揮發(fā)性大的溶劑時,測量過程中吸收池應加蓋。
2.2、測試波長的選擇
當用可見分光光度計對溶液進行測定時,先需要選擇合適的測量波長。選擇的依據(jù)是該被測溶液的吸收曲線。在般情況下,我們總是選擇大吸收波長作為測量波長,這樣可以提高靈敏度。而在有些情況下大吸收峰很尖銳、吸收過大或附近有干擾存在,就不能選大吸收波長,而必須在保證有定靈敏度的情況下,選擇吸收曲線中的其它波長進行測定(曲線較平坦處對應的波長),以消除干擾。繪制吸收曲線是正確選擇波長的有效手段和方法。
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