分光光度計是利用物質對光吸收性進行定性和定量分析的物質，已廣泛應用于各行各業，主要用于純度的物質檢查、定量分析、結構鑒定。測量結果中總有可接受或不可接受的誤差。誤差來自測量過程的各個方面。我認為主要是從儀器性能和測量條件的選擇兩個方面進行的。

1、儀器本身性能帶來的誤差

1.1、復色光對比耳定律的偏離

比耳定律成立的前提條件是入射光的單色，但精度再高的儀器，即使是雙單色器的可見分光光度計，也只能得到幾乎單色的光，無法獲得純的單色光，它還包含個窄的光帶，與多色光的性質。多色光會導致法的正或負偏差。與固定的狹縫紫外光譜儀的光譜帶寬為1nm、2nm，和可調狹縫可以0。Inm；可見分光光度計具有帶寬6nm，SNM，或比十納米更。光譜帶寬應盡可能小，但隨著光譜分辨率的提高，儀器靈敏度降低，因此在選擇儀器時必須考慮各種條件的影響。當溶液濃度小，單色光純凈時，可以假定符合定律。

1.2、雜散光的影響

雜散光是指探測器的其它波長分量在被測波長的光譜帶寬上。其原因有：分光光度計色散元件、反射鏡、透鏡和單色儀、壁塵等。波長波段的分光光度計、單色儀的透光率、光源的輻射強度和探測器的靈敏度都較低，雜散光的影響更為顯著。的雜光分析儀器的上限會導致測量誤差嚴重，實際工作中，在定量分析中，在或接近的樣品測定吸光度般的吸收峰，如果有雜光波長的分析，樣品的透過率較小，和雜散光大部分通過測量吸收，這是低于實際吸收。

1.3、儀器噪聲對測t的影響

儀器噪聲也是儀器的個重要指標，它表征儀器做稀溶液的能力。是疊加在待測量的分析信號中的不需要的信號，掃描100%T和0%T線，可觀察到紫外可見分光光度計的絕對噪聲水平，如果儀器噪聲較大，會掩蓋較小的測量信號，般用噪音的二倍來表示儀器的靈敏度。

1.4、波長和吸光度準確度

樣品的每個值都是在定的波長下測得的，如果波長誤差很大，測出的值肯定不準。吸光度準確度也是用戶對儀器的直接要求，更應引起足夠的重視。家計量檢定規程規定雙光束紫外可見分光光度計透射比準確度為A士0.6%, B土1.0%。

2、測量條件的選擇

2.1、參比溶液和溶荊的選擇

上海儀電分析分光光度計的測量實際上是以通過參比池的光強度作為人射光強度來測定試樣的吸光度，先調節儀器使透過參比池溶液的吸光度為零，然后讓同束光通過樣品，使得吸光度比較真實地反映待測物質的濃度，所以參比溶液的選擇非常重要。如果僅有待測物質與顯色劑的反應產物有吸收，可用純溶劑或蒸餾水作參比溶液。如果顯色劑有顏色，并在測定波長下有吸收，則用顯色劑溶液作參比溶液，所加人顯色劑及其它試劑的量，與試樣中的加入量應致。如果樣品中其它組分本身的顏色對測定有干擾，而所用顯色劑沒顏色，則用不加顯色劑的樣品溶液作參比液。

正確選擇合適的溶劑，對提高分析的準確度起重要作用。為減小溶劑中雜質的影響，應選擇高純度的溶劑;溶劑應不與待測物質發生化學反應;待測物在溶劑中要有定的溶解度;在測定的波長范圍內，溶劑本身沒有吸收，注意常用溶劑的短可用波長;當用揮發性大的溶劑時，測量過程中吸收池應加蓋。

2.2、測試波長的選擇

當用分光光度計對溶液進行測定時，先需要選擇合適的測量波長。選擇的依據是該被測溶液的吸收曲線。在般情況下，我們總是選擇大吸收波長作為測量波長，這樣可以提高靈敏度。而在有些情況下大吸收峰很尖銳、吸收過大或附近有干擾存在，就不能選大吸收波長，而必須在保證有定靈敏度的情況下，選擇吸收曲線中的其它波長進行測定（曲線較平坦處對應的波長），以消除干擾。繪制吸收曲線是正確選擇波長的有效手段和方法。

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